Milieux de culture : préparation et contrôle qualité (MacConkey, Mueller-Hinton)

Les milieux déshydratés (MacConkey, Mueller-Hinton, Sabouraud, Hektoen…) offrent souplesse et économie, à condition d'être préparés rigoureusement. Une erreur de pesée ou de pH compromet l'isolement comme l'antibiogramme.

Préparation pas à pas

• Peser la quantité exacte indiquée par lot et dissoudre dans l'eau distillée.
• Chauffer en agitant jusqu'à dissolution complète, puis autoclaver selon la notice.
• Refroidir à ~50 °C avant de couler en boîtes, sous hotte si possible.
• Contrôler le pH du milieu final à l'aide d'une bandelette ou d'un pH-mètre.

Contrôle qualité

Avant la mise en service d'un nouveau lot, ensemencez des souches de référence pour vérifier la pousse attendue et les réactions caractéristiques (par ex. fermentation du lactose sur MacConkey). Pour le Mueller-Hinton, l'épaisseur de la gélose (≈ 4 mm) est critique pour la validité de l'antibiogramme.

« Un milieu de culture, c'est un consommable mais aussi un réactif : il se contrôle comme tel. »

Conservation

• Conserver les géloses coulées à +2 à +8 °C, à l'abri de la lumière.
• Identifier chaque boîte (milieu, lot, date) et respecter la date limite d'utilisation.
• Éliminer toute boîte présentant un dessèchement, une contamination ou une hémolyse anormale.

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