Antibiogramme : réussir son Mueller-Hinton

L'antibiogramme par diffusion en gélose (méthode des disques) guide chaque jour des décisions thérapeutiques. Sa fiabilité repose sur une standardisation stricte : un écart sur l'inoculum, la gélose ou l'incubation peut décaler les diamètres et changer une catégorisation S/I/R.

Préparer la gélose et l'inoculum

• Couler une gélose Mueller-Hinton d'épaisseur homogène (≈ 4 mm) : trop fine, elle surestime les diamètres ; trop épaisse, elle les sous-estime.
• Ajuster l'inoculum à 0,5 McFarland à partir d'une culture jeune, et ensemencer dans les 15 minutes.
• Écouvillonner en trois directions pour un tapis bactérien confluent et régulier.
• Déposer les disques sur gélose sèche, bien plaqués, sans les déplacer après contact.

Incuber et mesurer

Incuber dans les délais et à la température recommandés par le référentiel (CA-SFM / EUCAST), sans empiler les boîtes pour ne pas créer de gradient thermique. La lecture des diamètres se fait à la règle ou au pied à coulisse, sur fond contrasté, en mesurant la zone d'inhibition complète.

« Un antibiogramme non standardisé n'est pas approximatif : il est faux. La rigueur du protocole fait la valeur du résultat. »— Principe de l'antibiogramme

Le contrôle qualité

• Tester régulièrement des souches de référence (ATCC) pour vérifier que les diamètres restent dans les intervalles attendus.
• Surveiller les dates de péremption des disques et leur conservation (dessiccant, froid).
• Confronter chaque profil au référentiel en vigueur pour la catégorisation finale.

Milieux Mueller-Hinton Liofilchem, disques d'antibiotiques et standards de turbidité : Angela Diagnostics fournit les consommables de l'antibiogramme aux laboratoires de Yaoundé et Douala. Demandez votre devis.